纖維蛋白原的生物化學分析論文

　　摘要：纖維蛋白原 (Fibrinogen, Fib) 可能會引發心血管、惡性腫瘤、糖尿病等相關疾病, Fib經過遺傳變異之后, 導致人體出血或者產生血栓性疾病。因此, 在臨床領域對Fib的測定顯得十分重視。本文對纖維蛋白原的生物化學進行分析, 并對其檢測方式和評價加以闡述。

　　關鍵詞：纖維蛋白原; 生物化學; 檢測方法;

　　纖維蛋白原的英文縮寫為Fib, 屬于血漿中具有較高含量的凝血蛋白, 主要構成要素為巨核細胞和肝細胞。從傳統的角度來看, Fib的主要作用是作為消耗性凝血病的診斷指標, 如若人體中的Fib數值較高, 則極易引發冠心病、血栓性疾病、自發流產等疾病, 因此, 我國對此加強了重視, 并對測定精度等方面的要求也進行了提升。

　　1 纖維蛋白原的生物化學分析。

　　1.1 分子結構。

　　Fib屬于一種對稱二聚體結構, 主要組成部分為α、β以及γ鏈。從電鏡顯示中可看出, Fib分子呈現出棒狀的結構, 具有3個球狀區域。中心地區位E區, 主要構成為6條多肽鏈的N末端, 左右兩邊區域被稱為D區, 主要構成為Bβ以及γ鏈的C末端。其中, Aα鏈的C端不受D區域的管轄, 具有較強的自由性。E區和D區之間有3條多肽鏈, 它們共同構成了一個盤繞螺旋區域。

　　1.2 分子性能。

　　Fib在人體中屬于高度異質性的蛋白, 此種特性主要是受到基因多態的影響, 并且由m RNA的翻譯和剪接以后呈現出來。比如, Aα鏈中, 如若其末端受到絲氨酸、蛋白酶等元素的影響, 在很大程度上對γ鏈和Bβ中的糖鏈成分造成破壞, 則其異質性將被充分突顯出來。在國外, 此方面的研究專家Nieuwenhuizen提出, 在人類中存在成千上萬Fib分子, 并且Fib分子中所具備的異質性, 不但對生理和病理具有較大的影響, 同時在利用不同的測定方式對Fib進行檢測時, 也將會獲取不一樣的結果[1]。

　　Aα鏈異質性的主要體現在于人類外周血中有將近55%的Aα鏈含量, 相當于611個氨基酸, 而其他的45%中也存在著少量氨基酸, 這里所形成的Aα鏈屬于受到酶水解的代謝物質, 其中包括HMW、LMW兩種, 并且在HMW中具備兩條完整的Aα鏈, 而在LME中存在一條完整的Aα鏈。與LMW相比來看, HMW的凝固性較強, 因此使用功能法的方式對Fib進行測定的過程中, 分子中存在的異質性將會在一定程度上對最終結果產生影響。

　　Bβ鏈的異質性不甚明顯, 該鏈條中含有461個氨基酸, 在測量中對結果的影響不太顯著。在γ鏈中, 主要包含411個氨基酸, 專家Francis提出, 對于成人來說, 通常在體內的γ鏈分子含量為3種, 即50k D、55k D、57.5k D。其中, 最高γ鏈的產生主要是受到m RNA的影響, 人體內的γ鏈含量大約占7%。

　　2 纖維蛋白原的檢測方式和評價。

　　現階段, 由于對Fib的重視程度較高, 因此在測定方式上也變得更加多樣, 其主要檢測原理可以劃分為3大類別, 即可凝固蛋白法、物理-化學法、免疫學法。近幾年, 自動化血凝儀不斷創新和優化, 得到了更加廣泛的應用, 在測量方式上, 也從以往的凝血酶時間測定轉變為PT-der測定法。

　　2.1 熱/鹽沉淀法。

　　我國目前應用最為廣泛的Fib測定方式為熱/鹽沉淀法, 按照相關文獻中的內容進行操作, 在部分文獻中還推薦了亞硫酸鈉鹽析法等測量方式, 由于此種方式在特異性方面的顯示不甚強烈, 在血漿中易與其他蛋白之間相互產生作用, 對最終測定結果的精準度產生不利影響, 因此最后得到的結果往往偏高。

　　2.2 von Class法。

　　在可凝固法中, 最為常用的一種便是von Class法, 此測定方式的原理:首先選擇足夠數量的凝血酶與稀釋后的血漿相融合, 對其中產生纖維蛋白的時間進行記錄, 蛋白產生的時間與蛋白原含量之間呈現反比例關系。此方式的使用十分簡單方便、操作簡易、實施效率高, 具有良好的特異性, 是當前十分受歐美等發達國家歡迎的Fib測定方式, 并且已經有相關廠家開始生產與該方式相配套的試劑盒。但由于Fib具有較強的異質性, 因此, 在對產物進行降解處理的過程中, 其中存在的肝素等物質將會在一定程度上對最終的測試結果產生干擾[2]。

　　2.3 可凝固蛋白法。

　　在可凝固蛋白法的實施過程中, 主要原理為將凝血酶與血漿相融合, 使Fib凝結成蛋白狀固體, 對固體進行收集后沖洗干凈, 利用適當的儀器稱重, 或者利用尿素或強堿相融合以后, 對比和測定其色澤程度。利用此種方式能夠對Fib中的凝血作用進行充分反映, 準確地判斷其功能和性質。英國生物標準研究所對此方面進行研究后, 提出的Jacobsson改良方式, 與該方法有異曲同工之妙。但是, 由于英國提出的改良方式實施起來較為繁瑣復雜, 與此種方式相比來看可行性較差, 因此只能用作參考。

　　3 結語。

　　Fib與心血管疾病、惡性腫瘤、糖尿病等疾病有著密切關系, Fib的檢測方式多種多樣, 應根據具體的實際情況進行檢驗, 以此來保障檢測結果的準確性和真實性。

　　參考文獻

　　[1]趙靜.蚯蚓蛋白同功酶Ⅲ-1、Ⅱ結構與功能的研究[D].長春:吉林大學, 2014.

　　[2]王曉霞.H2N (CH2) 7-CO-Gly-Asp-Trp的設計、合成及抗血小板作用的研究[D].太原:山西醫科大學, 2015.

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