神經外科病房呼吸道感染病原菌分布及藥敏

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　　神經外科病房呼吸道感染病原菌分布及藥敏【1】

　　摘要：目的 研究分析神經外科病房患者呼吸道感染常見的病原菌及其耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。

　　策略 收集2013年3月～2014年2月，我院神經外科住院患者1082份呼吸道標本，按相應要求分離鑒定病原菌，并進行藥敏試驗，統計所分離病原菌的分布及耐藥性。

　　結果 我院檢出病原菌639株，陽性率59.1%。

　　其中革蘭陰性桿菌583株，革蘭陽性球菌36株，真菌20株。

　　G-桿菌對氨芐西林等抗菌藥物均有較高的耐藥率，但對亞胺培南等敏感性較高。

　　G+球菌對青霉素類抗菌藥物均耐藥，但對萬古霉素等保持高度敏感率。

　　白色念珠菌對抗真菌藥物敏感性好。

　　結論 神經外科病房呼吸道感染病原菌以革蘭陰性桿菌為主，對常用抗菌藥物耐藥性高，定期進行藥敏試驗和耐藥趨勢分析，對合理選擇抗菌藥物具有重要指導作用。

　　關鍵詞：神經外科;呼吸道感染;藥敏分析;病原菌

　　目前市場上抗生素種類多，更新快，抗生素大量使用造成耐藥菌日趨增長，耐藥菌感染是醫院感染的主要理由[1-2]。

　　本文總結了2013年3月～2014年2月，我院神經外科住院患者呼吸道標本所分離病原菌的分布及耐藥性，對于指導臨床醫師合理選擇抗菌藥物及減少醫院感染具有重要作用[3]。

　　1資料與策略

　　1.1細菌來源 收集我院2013年3月～2014年2月神經外科住院患者呼吸道標本1082份。

　　質控菌株：ATCC25922(大腸埃希菌)、ATCC27853(銅綠假單胞菌)、ATCC29213(金黃色葡萄球菌)，購自衛生部臨床檢驗中心。

　　1.2試劑 藥敏紙片購自北京天壇藥物生物技術公司，培養基為鄭州安圖綠科生物工程公司產品。

　　1.3策略 首先對痰標本進行涂片檢查，符合要求的進行培養。

　　儀器是西門子WALK AWAY96全自動細菌鑒定及藥敏分析儀，并使用該儀器原配的鑒定板，所有過程按照標準操作規程嚴格進行。

　　2結果

　　2.1病原菌分布情況 我院神經外科呼吸道標本總數1082份，其中檢出病原菌639株，陽性率59.1%。

　　以革蘭陰性桿菌為主，占91.2%，其次是革蘭陽性球菌和真菌，見表1。

　　2.2 病原菌藥敏實驗結果 革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌的藥敏試驗結果，見表2、表3。

　　3討論

　　神經外科呼吸道感染病原菌陽性檢出率較高，以革蘭陰性菌為主，而革蘭陽性菌和真菌所占比例較小，該結果與報到文獻類似，只是各病原菌構成比稍顯不同[4]。

　　根據藥敏試驗分析，G-桿菌對臨床常用的氨芐西林、哌拉西林、頭孢唑林、頭孢曲松、四環素、復方新諾明等抗菌藥物均有較高的耐藥率，目前對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦敏感性較高，但隨著臨床應用的增加會出現較多耐藥菌株，因此臨床要特別關注多重耐藥菌。

　　G+球菌中金黃色葡萄球(MRSA)的比例也較高，該菌株對所有β-內酰胺類藥物均耐藥，不論藥敏結果如何，臨床使用均無效。

　　真菌感染呈上升趨勢，提示臨床醫生對長期大量使用抗生素患者要注意預防。

　　加強病原學及耐藥監測，對醫院感染和臨床用藥具有指導作用。

　　參考文獻：

　　[1]凌宙貴，劉衛，蔣連強，等.下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2013，23(014)：3545-3547.

　　[2]牛瑞超，羅百靈，張立，等.近16年呼吸科病房下呼吸道細菌感染的病原體變遷，分布及藥敏差異[J].臨床肺科雜志，2013，18(2)：247-250.

　　[3]李鳳娥，曹銀芳，燕成嶺.下呼吸道感染病原菌的臨床分布與耐藥性研究[J].中華醫院感染學雜志，2013，23(3)：689-691.

　　[4]牛瑞超，羅百靈，張立，等.呼吸科普通病房和呼吸重癥加強治療病房下呼吸道感染病原體的分布及藥敏差異[J].中國呼吸與危重監護雜志，2013，12(2)：124-128.

　　微波消解—ICP—MS法測定壯藥美巧杯中5種重金屬的含量【2】

　　【摘要】目的：建立電感耦合等離子質譜(ICP-MS)法測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬含量的策略。

　　策略：樣品經混合酸微波消解后，用電感耦合等離子體質譜儀測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬的含量。

　　結果：該策略對各元素的檢出限為00048～00518ng/ml，回收率為87%～97%，國家標準物質茶葉(GBW10016)的測定值和標準值基本吻合。

　　結論：所建立的策略快速、準確、靈敏度高，可用于測定壯藥美巧杯中5中重金屬的含量。

　　【關鍵詞】壯藥;美巧杯;重金屬;電感耦合等離子體質譜法;微波消解

　　鉛、鎘、砷、汞、銅是目前公認對人體有害的重金屬元素，在人體內蓄積至一定量時可引起免疫系統障礙和多種功能損害，并影響人體的新陳代謝及正常的生理功能[1-3]。

　　而壯藥中重金屬的含量理由已是確保壯藥“安全、有效、可控”的首要理由之一。

　　然而由于環境污染加劇，藥材種植常使用大量化肥、農藥等，導致壯藥重金屬含量超標較為常見。

　　因此建立一種快速、簡便、準確、環保的壯藥中重金屬的測定策略十分必要。

　　重金屬元素的測定策略主要有原子吸收光譜法 [4-5]、原子熒光法[6-8]、電感耦合等離子體發射光譜(ICP-AES)[9-12]、電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)[13-16] 、X 射線熒光光譜法[17]等。

　　其中ICP-MS法克服了傳統策略的大多缺點，具有較高的靈敏度，干擾小，可同時快速測定多種元素的優點，目前應用較廣泛。

　　本試驗采用微波消解-ICP-MS法同時測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬的含量，不但可作為壯藥材美巧杯重金屬安全性評價的依據，而且可為壯藥美巧杯臨床用藥的安全提供參考。

　　1儀器與材料

　　11儀器電子分析天平(瑞士Mettler AE240)，7700型電感耦合等離子體質譜儀(美國Agilent公司)，Multiwate3000高性能微波樣品制備儀(奧地利Anton Paar公司)。

　　12材料鉛、鎘、砷、汞、銅元素標準溶液濃度均為1000μg/ml，購于國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院及中國計量科學研究院;內標混合液濃度為100μg/ml，由美國Agilent公司提供，使用前用一級純化水稀釋100倍;過氧化氫、硝酸均為優級純;水為純化水。

　　10批美巧杯樣品均收集于廣西，其原植物經本所黃桂華副主任藥師鑒定為大戟科植物白桐樹Claoxylon polot(Burm) Merr[C Indicum(Reinew ex Blume) Hassk]，樣品批號、收集地點為：20101102(廣西隆安縣龍虎山);20101124(廣西南寧高峰林場);20110506(廣西南寧市郊雙定村);20110513(廣西隆安縣龍虎山自然保護區);20101125(廣西隆安縣屏山鄉雅力村);20101126(廣西大新縣全茗鎮靈熬村);20110221(廣西靖西縣);20110310(廣西柳江縣);20110325(廣西金秀縣);20110326(廣西三江縣)。

　　2策略與結果

　　21供試品溶液的制備稱取供試品粉末05g置消解罐中，精密加入5ml硝酸、2ml過氧化氫，蓋好安全閥后，將消解罐放入消解系統中，按照表1設置微波消解條件消解樣品，消解完畢后，用一級純化水將內容物轉入50ml量瓶中并定容至刻度，混勻。

　　同法制備試劑空白溶液。

　　22儀器參數條件ICP-MS儀器的工作參數為儀器全自動調諧優化給出，滿足儀器安裝標準要求的靈敏度、背景、氧化物、雙電荷、穩定性等各項指標，經調諧后的儀器參數設置如表2所示。

　　23策略學考察

　　231內標及同位素的選擇試驗內標及待測元素同位素的選擇依照2010年版《中國藥典》(一部)規定的策略[18]，選63Cu、75As、114Cd、202Hg 、208Pb及作為待測同位素，其中所選72Ge作為63Cu、75As的內標元素，115In作為114Cd的內標元素，209Bi作為202Hg 、208Pb的內標元素。

　　232標準曲線的制定及檢出限的確定分別量取鉛、鎘、砷、汞、銅元素標準溶液適量，用10%硝酸溶液(V/V)逐級稀釋成含Pb、Cd、As濃度為0、25、5、10、20ng/ml;Cu濃度為0、50、100、200、400ng/ml;Hg濃度為0、05、1、2、5ng/ml的混合標準溶液系列。

　　以相應元素的濃度為橫坐標，以相應元素與所選內標元素響應值比——相應離子每秒計數值(CPS)比為縱坐標，繪制標準曲線。

　　重復測定空白溶液11次，得出5種元素的檢出限。

　　各元素的回歸方程和檢出限見表3。

　　233精密度試驗將混合標準品溶液(Pb、Cd、As各25ng/ml，Hg 05ng/ml，Cu 50ng/ml)，連續進6針，計算RSD分別為：25%、163%、262%、36%、325%。

　　234重復性試驗取樣品批號為20101102的供試品溶液，平行測定6次，計算RSD分別為：672%、234%、492%、823%、315%。

　　234回收率試驗取已知含量的樣品(批號為20101102)粉末6份，每份05g，分別置消解罐中，精密加入鉛、砷標準溶液各05μg、鎘標準溶液025μg、銅標準溶液10μg、汞標準溶液0015μg及5ml硝酸、2ml過氧化氫，蓋好安全閥后，將消解罐放入消解系統中，按照表1設置微波消解條件消解樣品，消解完畢后，用一級純化水將內容物轉入50ml量瓶中并定容至刻度，混勻，即得。

　　各元素平均回收率見表4。

　　235標準物質茶葉(GBW10016)的分析取國家標準物質茶葉(GBW10016)6份，按“21”項下的策略操作，對鉛、鎘、砷、汞、銅元素含量進行測定，結果見表5。

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